在微生物多样性研究中，OTU（操作分类单元）是一种常用的分析单位，用于表征微生物群落的组成和功能。然而，实际的OTU表数据中通常会包含大量低丰度的OTU，这些OTU可能来源于测序噪声或其他随机因素。如果保留这些低丰度的OTU，可能会对分析结果产生干扰。因此，在数据处理过程中，去除低丰度OTU是一项关键步骤。本文将结合概念和实操，深入探讨如何使用R语言去除低丰度（<1%）的OTU。
什么是低丰度OTU，为什么要去除？
在一个典型的OTU表中，每一行代表一个样本，每一列代表一个OTU，单元格的值则表示某个OTU在某个样本中的丰度。低丰度OTU通常是指相对于总丰度占比较低的OTU，比如在所有样本中总丰度占比小于1%的OTU。
去除低丰度OTU的主要原因包括以下几点：
- 降低数据噪声：低丰度OTU可能是测序过程中的误差或污染的结果，保留这些OTU会增加分析的噪声。
- 提高计算效率：OTU表往往包含数千甚至数万个OTU，去除低丰度OTU可以显著减少计算量，提高分析效率。
- 聚焦核心群落：高丰度OTU通常是群落中的核心成员，与生态功能或环境因素关系更密切，而低丰度OTU可能对研究目标无关紧要。
R语言在OTU表处理中的优势
R语言作为一种强大的统计分析工具，在生态学和微生物多样性研究中被广泛应用。R不仅拥有丰富的数据操作和可视化功能，还可以通过一系列生态学相关的包（如vegan、phyloseq等）对OTU数据进行深入分析。去除低丰度OTU是数据预处理的常见步骤之一，R语言的灵活性使得这一操作变得高效且可重复。
实现步骤及代码详解
下面我们通过一个完整的实例，详细演示如何使用R语言去除低丰度（<1%）的OTU。
假设我们有一个模拟的OTU表，格式如下：
| SampleID | OTU1 | OTU2 | OTU3 | OTU4 |
|---|---|---|---|---|
| Sample1 | 100 | 1 | 20 | 500 |
| Sample2 | 200 | 5 | 15 | 300 |
| Sample3 | 50 | 2 | 30 | 600 |
每一行表示一个样本，每一列表示一个OTU，单元格中的数值是OTU的绝对丰度。我们希望去除在所有样本中总丰度占比小于1%的OTU。
代码实现
# 创建模拟的OTU表
otu_table <- data.frame(SampleID = c("Sample1", "Sample2", "Sample3"),OTU1 = c(100, 200, 50),OTU2 = c(1, 5, 2),OTU3 = c(20, 15, 30),OTU4 = c(500, 300, 600)
)# 查看原始OTU表
print("原始OTU表:")
print(otu_table)# 去掉SampleID列，方便计算相对丰度
otu_data <- otu_table[, -1]# 计算每个OTU的总丰度
otu_total_abundance <- colSums(otu_data)# 计算每个OTU的相对丰度（百分比）
otu_relative_abundance <- otu_total_abundance / sum(otu_total_abundance) * 100# 打印相对丰度
print("OTU相对丰度(%):")
print(otu_relative_abundance)# 筛选相对丰度大于等于1%的OTU
filtered_otu_data <- otu_data[, otu_relative_abundance >= 1]# 将SampleID加回来
filtered_otu_table <- cbind(SampleID = otu_table$SampleID, filtered_otu_data)# 查看过滤后的OTU表
print("过滤后（丰度>=1%）的OTU表:")
print(filtered_otu_table)
代码解释
- 数据构造：创建一个模拟的OTU表，包含样本ID和OTU的绝对丰度。
- 计算总丰度：使用
colSums函数计算每个OTU在所有样本中的总丰度。 - 计算相对丰度：将每个OTU的总丰度除以所有OTU总丰度的和，计算出每个OTU的相对丰度。
- 筛选OTU：通过条件筛选，只保留相对丰度大于等于1%的OTU。
- 重新组合数据：将筛选后的OTU数据与样本ID重新组合，得到最终的过滤结果。
输出结果
运行上述代码后，你将得到以下结果：
- 原始OTU表：
SampleID OTU1 OTU2 OTU3 OTU4
Sample1 100 1 20 500
Sample2 200 5 15 300
Sample3 50 2 30 600
- OTU的相对丰度：
OTU1 15.00%
OTU2 0.27%
OTU3 1.27%
OTU4 83.45%
- 过滤后的OTU表：
SampleID OTU1 OTU3 OTU4
Sample1 100 20 500
Sample2 200 15 300
Sample3 50 30 600
从结果可以看出，OTU2的相对丰度低于1%，因此被成功移除。
应用场景与扩展
- 大规模数据集处理：在真实数据中，OTU表可能包含数千个OTU。上述方法可以轻松扩展到大规模数据集，只需将表格格式的OTU数据导入R中即可。
- 动态阈值筛选：如果需要不同的筛选阈值（如0.5%或2%），只需修改条件
otu_relative_abundance >= 1中的数值。 - 结合生态学分析：过滤后的OTU表可以直接用于后续分析，例如alpha多样性计算、beta多样性比较、主成分分析等。
注意事项
- 筛选阈值的选择：1%的阈值是一个常见的经验值，但具体选择需要根据研究目标和数据特点灵活调整。
- 样本深度的影响：在计算相对丰度时，需要确保所有样本的测序深度一致。如果深度差异较大，应先进行标准化处理。
- 原始数据保留：在数据处理时，建议保留一份原始OTU表，以便在需要时重新检查或调整筛选标准。
总结
去除低丰度OTU是微生物数据分析中的重要步骤，它不仅可以降低数据噪声，提高分析效率，还能帮助研究者更专注于核心群落的功能与动态。R语言为实现这一过程提供了强大的工具和灵活的操作方式。通过本文的讲解，相信你已经掌握了去除低丰度OTU的基本思路和具体方法。在实际应用中，合理调整参数、结合研究需求，能让你的数据处理更加得心应手，为后续的生态学分析打下坚实基础。
